RosetteSep™是一种快速简便的免疫密度梯度离心分选方法，用于直接从全血中分离无标记的细胞。通过将非目的细胞与样本中存在的红细胞（RBC）交联，然后使用密度梯度离心液Lymphoprep™, Ficoll-Paque™, RosetteSep™DM-L密度梯度离心液 或 RosetteSep™DM-M密度梯度离心液进行标准密度梯度离心，例如外周血单个核细胞（PBMC）分离期间同时纯化目标细胞。这种方法显著减少了样本处理时间，并通过将细胞亚群分选纳入离心过程，最大程度地提高便利性。

RosetteSep™ 如何工作？

• 非目的细胞通过特异性抗体与红细胞交联，形成致密的免疫花环状结构。
• 在密度梯度离心期间，在血浆和密度梯度离心液之间的界面上留下未标记的高纯度目标细胞。
• 不需要分离柱或磁极。只需要孵育、离心，便可收集纯化的细胞。

典型的 RosetteSep™ 细胞富集方案

1. 1. 将 RosetteSep™富集抗体混合物加入全血中孵育 20 分钟（如果使用SepMate™则孵育10分钟）。之后用等体积 PBS + 2%FBS 稀释样本，轻轻混合。
2. 2. 将稀释后的样本在密度梯度离心液上铺层。使用 SepMate™ 可防止分层之间的混合。
3. 3. 室温 1200 x g 离心 20 分钟，关闭刹车。使用SepMate™ 在开启刹车的情况下，可将离心时间缩短至 10 分钟。
4. 4. 从密度梯度离心液和血浆界面分层吸取富集后的细胞。用 PBS + 2%FBS 清洗富集的细胞。重复一次。

主要应用

直接从全血中分选细胞

NK 细胞杀伤功能案例研究讨论了来自马里兰大学医学院 Ajay Jain 博士实验室的文献，该实验室使用RosetteSep™搭配 SepMate™将 450mL 血液单位的 NK 细胞分选时间从 4 小时减少到 1 小时。