RosetteSep™是一种快速简便的免疫密度梯度离心分选方法，用于直接从全血中分离未经标记的细胞。通过将不需要的细胞与样品中存在的红细胞（RBC）交联，在使用介质Lymphoprep™, Ficoll-Paque™, RosetteSep™DM-L 密度介质 或 RosetteSep™DM-M 密度介质进行标准密度梯度离心，例如外周血单个核细胞（PBMC）分离期间同时纯化目标细胞。这种方法显著减少了样品处理时间，并通过将细胞亚群分选纳入离心过程，最大限度地提高了便利性。

RosetteSep™ 如何工作？

• 不需要的细胞通过特异性抗体与红细胞交联，形成致密的免疫花环状结构。
• 在密度梯度离心期间，在血浆和密度梯度介质之间的界面上留下未被标记的高纯度目标细胞。
• 不需要分选柱或磁极。只需要孵育、离心，便可收集纯化的细胞。

典型的 RosetteSep™ 细胞富集方案

1. 1. 将 RosetteSep™富集抗体混合物加入全血中孵育 20 分钟（如果使用SepMate™则孵育10分钟）。之后用等体积 PBS + 2%FBS 稀释样品，轻轻混合。
2. 2. 将稀释后的样品在密度介质上铺层。使用 SepMate™ 可防止分层之间的混合。
3. 3. 室温 1200 x g 离心 20 分钟，关闭刹车。使用SepMate™ 在开启刹车的情况下，可将离心时间缩短至 10 分钟。
4. 4. 从密度梯度离心液和血浆界面分层吸取富集后的细胞。用 PBS + 2%FBS 清洗富集的细胞。重复一次。

主要应用

直接从全血中分选细胞

NK 细胞杀伤功能案例研究讨论了来自马里兰大学医学院 Ajay Jain 博士实验室的文献，该实验室使用RosetteSep™搭配 SepMate™将 450mL 血液单位的 NK 细胞分选时间从 4 小时减少到 1 小时。