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CHO和其他细胞系开发

构建表达重组蛋白的CHO细胞系的第一步通常是将携带目标基因和可筛选标记的表达载体转入细胞中。查看更多目标是筛选出能稳定表达且 产生高滴度的生物活性重组蛋白(如单克隆抗体)的CHO细胞。在转染过程中引入可筛选标记,从而可基于对特定化合物(例如抗生素,如G418潮霉素)的耐药性,或通过克服某一代谢途径受阻断的能力而筛选整合了外源DNA的细胞。随后,可通过ELISA或功能学筛查等合适的方法鉴定稳定表达共转染目的基因的细胞。无论采用何种筛选方式,在细胞株开发中,在 半固体CHO培养基 中进行筛选具有显著优势:克隆与筛选同时进行,从而缩短细胞系开发周期,并最大限度地降低损失高产的稀有克隆的可能性。另一方面,如果先在液体培养基中进行筛选,则下一步还需进行单克隆细胞系的分离。

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细胞培养基及添加物 4 (8)

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