国际细胞治疗学会（ISCT）制定了培养后的间充质基质细胞（mesenchymal stromal cells，MSC；也称为间充质干细胞）的基本标准¹。其中包括于体外进行三谱系分化的能力，即向成骨, 脂肪和软骨分化。

为了检测其成骨分化的能力，STEMCELL Technologies提供了2种不同的试剂盒，分别针对人MSCs和小鼠MSCs。

• 成骨分化试剂盒（人）专为人MSCs于体外进行成骨谱系的细胞分化设计（图1）。
• MesenCult™成骨激生试剂盒（小鼠）优化用于从小鼠密质骨（compact bone，CB）/骨髓（bone marrow，BM）来源的MSCs、脂肪组织来源的小鼠基质细胞（ADSCs），或小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts，MEFs）进行体外分化为成骨细胞。

要进行成骨分化，MSCs应至少培养至95-98%的满板率。有时，当培养的细胞密度过大时，会造成大量的骨矿物质沉积，细胞会开始回缩并从培养板上脱落。下面描述了一些针对此种问题的解决方法。

1. 在接种需要进行分化的细胞前，对培养器皿使用collagen或其他底物进行包被。
2. 当进行培养基换液时，动作尽可能轻柔。避免枪头戳到细胞，否则可能会引起细胞脱落。
3. 虽然成骨细胞的分化和成熟的过程需要大约14 - 21天，需定期在镜下观察和评估分化情况，在适当时进行染色。培养物可在被固定后，通过评估碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP；在成骨细胞种表达量上调）活力、von Kossa染色（反应矿物化水平）或使用茜素红（Alizarin red，钙染色）监测成骨分化水平。