多能干细胞培养手册：告别“玄学”，建议人手一份

满怀期待地走进细胞房，把培养皿放上显微镜，结果心凉了一半：原本养得好好的多能干细胞，不仅中心不再发亮，边缘还失去了完整的边界，甚至长出了各种奇形怪状的自发分化细胞......

别慌！

作为深耕干细胞领域数十年的技术引领者，STEMCELL已在全球范围内建立起成熟、可复现的多能干细胞培养体系，TeSR™系列培养基更被广泛视为行业“金标准”。

基于经过大量实验验证与一线经验沉淀的体系，我们将关键操作要点系统化梳理，精心制作了一份“即用型”技术指南——《多能干细胞培养手册》。从基质包被、细胞传代到冻存复苏，从形态学判读到多能性评估，再到培养体系的平稳过渡，这本手册覆盖多能干细胞培养全过程中的核心决策点，旨在把不可控的“玄学”变成可复制的标准流程。

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亮点内容速览

亮点1：别再盲目选基质，这里有最清晰的“基质选择指南”

市面上的基质种类繁多，到底该如何选择？手册提供了清晰的参数对比建议：

• 如果是新建体系、需要更高容错率，可以选择STEMmatrix™ BME，其能够更好地模拟体内微环境；
• 如果对异源动物成分较为敏感，可以选择Vitronectin XF™，其可在15 - 25℃室温下操作，且不会发生凝胶化。

不同基质的特点

亮点2：终结传代玄学，精准锁定“黄金解离时间”和“理想团块”

还在靠“差不多了”来判断消化终点吗？手册指出：传代时理想的细胞团块大小应为50 - 200 μm。使用无酶温和细胞解离试剂（GCDR）时：

• 在Vitronectin XF™上推荐孵育6 - 12分钟
• 在Corning® Matrigel®上则需6 - 8分钟

图示 GCDR对在Vitronectin XF™基质和mTeSR™1中培养的hESC的影响

时间过短，克隆解离不充分；时间过长，则容易过度解离。手册配有高清对比图，判断一目了然。

亮点3：学会“看相”，纠正常见形态学误区

细胞克隆边缘出现“尖刺状”，是否意味着分化？未必如此。

手册指出，在传代后的前几天，细胞排列较为松散、边缘呈尖刺状属于正常现象，无需过度担忧。但如果克隆中心出现“斑驳状、零星分布的高折光区域”，或自发分化区域超过 10%，则可能提示细胞质量下降。

图示 STiPS-M001克隆中的（A）自发分化区域和（B）失去克隆边界完整性并出现已分化细胞（橙色箭头）

谁会需要这份手册？

无论研究处于干细胞培养的哪个阶段，这份资料都能成为您的实用工具书：

刚进实验室的新手：是否遇到过“第1天换液细胞大量脱落”或“传代后贴壁率低”？手册整理了常见问题排查表，快速定位问题来源，例如基质状态变化或操作过程中的机械损伤等。

经常遇到细胞状态波动的进阶用户：总是掌握不好铺板密度？手册提供“团块计数法”，轻松掌握在96孔板中精准统计直径≥ 50 μm的细胞团块数量，计算铺板体积，告别“凭手感”。

准备更换培养体系的研究员：手册提供了不同无饲养层体系之间的过渡以及如何从传统饲养层体系过渡到无饲养层体系的详细方案，帮助实验平稳过渡，减少试错成本。

获取方式

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